特徴 作製の流れ 料金 抗体関連サービス ハイブリドーマ細胞培養による抗体作製 マウス腹水法による抗体作製 哺乳動物細胞による抗体作製 抗体の精製
モノクローナル 抗体作製 特徴
モノクローナル抗体作製の流れ 2ステップ
メディリッジの強み!
抗原準備
✔抗原性検索を実施し、抗原をご提案します。
✔組換えタンパク質やペプチドなどの抗原調製を承ります。
免疫~細胞融合
✔免疫動物全ての個体からリンパ球を抽出し、細胞融合に使用します。
スクリーニング
✔ELISA系のアレンジを承ります。
お客様のご評価
✔免疫開始後約2ヵ月後、お客様の系で抗体をご評価いただけます。
料金
ステップ1 | 730,000円(税別) |
陽性クローンが得られなかった場合、抗原を変えて再実施します。 |
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ステップ2 | 730,000円(税別) |
10クローン以上のクローニングは、別途費用にて承ります。 |
オプション |
・追加クローニング ・腹水生産 ・無血清馴化 ・ハイブリドーマ細胞培養 ・抗体精製など |
※2022年9月1日現在の税別価格となります。
R&DからGMP製造までワンストップの抗体関連サービス
医薬品開発・製造や承認・申請のコンサルティングも承ります!
ハイブリドーマ細胞培養による抗体作製
ご提供いただいたハイブリドーマ細胞を培養し、抗体精製を実施します。
培養は、ローラーボトル法またはバック培養法が基本となります。
抗体の性質や産生量により、インテグラセルライン法、フラスコ培養法、WAVE培養法などの対応も可能です。
作業の流れ
細胞起眠
1
ご提供いただいた細胞を起眠します。
無血清馴化
2~3週間
無血清馴化されていない場合は、無血清に馴化します。
無血清馴化せず抗体作製することも可能です。
大量培養
3~6週間
所定の方法でスケールアップ培養を実施します。
精製・分析
2~4週間
プロティンAまたはGによるアフィニティ精製を実施します。
より高純度の精製をご希望の場合は、ゲル濾過精製も可能です。
※50 L以上の大量製造の場合や、繰り返し製造をされる場合などは、小スケールでの至適条件の検討(トライアル)を実施します。
※写真はイメージです。
マウスを用いたin vivo抗体生産(マウス腹水法)
ハイブリドーマをお預かりして、抗体の製造を実施します。
※メディリッジで作製も可能です
マウス2匹~約1,000匹まで受託可能です。
作業の流れ
細胞起眠
培養 2~4週間
腹水生産 3~6週間
精製・分析 2~4週間
哺乳動物細胞(293系細胞、CHO系細胞等)による抗体作製
ご提供いただた哺乳動物細胞(293系細胞、CHO細胞)に目的の抗体遺伝子を導入し、抗体を作製します。
一過性発現や安定発現株の作製も承ります。
CHO細胞の培養による生産の場合
CHO細胞をお預かりしてスケールアップ培養を実施します。
小スケールでのプロトコル、結果をお預かりして、これを参考に計画書を作成します。
計画書に従って、フラスコ培養、 ジャーファーメンター培養、ローラーボトル法などで培養を実施します。
1回の培養スケールは、3L(5Lジャー、フラスコ、ローラーボトルなど)から50Lスケール(90Lタンク、ローラーボトル)までになります。
WAVE培養も実施できます。
抗体の精製
細胞培養法で得られた培養上清、腹水生産法で得られた腹水から抗体を精製します。
<精製方法>
- アフィニティ精製(プロテインAまたはGを使用)
- イオン交換精製(陰イオン交換または陽イオン交換精製)
- ゲル濾過精製(分子量の違いで精製する方法)
アフィニティ精製で純度が満たない場合には、イオン交換精製、ゲル濾過精製など組み合わせて実施することがあります。
その他、粗精製として硫安による塩析法、限外ろ過膜による分離を実施することがあります。